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Operation

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LAS System을사용하기위한기본적인설명이준비되어있습니다. Basic operation에서는장비각부분의명칭및사용가능한검출시작에대해서설명되어있으며, Software에서는크게두가지, control software를통해서이미지를찍는방법에대해서, 찍은이미지에대해서정량을위한 IQTL software에대해서설명이되어있습니다. Maintenance부분에서는hardware handling에대해서설명을하고있습니다.

las4000-1

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Basic Operation

Software

Maintenance

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Basic Operation

Software

Maintenance

LAS 4000

시스템 구성 및 각부 명칭

Las구성
명칭
설명
① Camera headCCD 냉각 기능과 이미지 데이터화
② Intelligent dark box(IDX)Dark box
③ 고감도 렌즈F0.85/43 mm
④ EPI light주파장 710nm의 NIR LED
주파장 630nm의 Red LED
주파장 520nm의 Green LED
주파장 460nm의 Blue LED
주파장 365nm의 UV LED Whit LED
⑤ Trans lightUV Transilluminator(주파장 312nm UV광원)
White Trans
⑥ FilterIR785 Alexa Filter
R670 Cy5 Filter
575DF20 Cy3 Filter
Y515 Filter
605DF40 EtBr Filter
L41 UV Filter
510DF10 GFP Filter
⑦ Sample TrayEPI Tray
White Trans Tray(trans 광원용)
UV Trans Tray(UV trans용)
NP Tray(Titer plate용)
⑧ 컴퓨터 본체촬영 조작과 이미지 저장장치

 

ImageQuant LAS4000 Control Software

imageQuant

Pos.
Name
Description
1
Menu
2
Exposure Type노출방법 설정
3
Exposure Time노출시간 설정
4
Sensitivity/Resolution민감도/해상도 설정
5
Add Digitization ImageDigitization 이미지 추가 설정
6
Setting state현재 선택된 실험 방법 표시
7
Setting state현재 선택된 tray 위치 표시
8
Method/Tray position실험 방법과 tray 위치 설정
9
Focusing초점 설정
10
Start시작

 

*한번의 조작으로 Chemiluminescence 이미지 외에 Digitize 이미지도 촬영할 수 있습니다(Method: Chemiluminescence의 경우에 한정)

 

LAS 4000 사용순서
① 본체, 주변기기의 전원을 켭니다.
② ImageQuant LAS 4000 Control Software 기동
③ Sample 준비
④ 검출
⑤ 해석(이미지 해석 소프트 ImageQuant TL)

light source에 따른 검출 가능한 시약

Chemiluminescence

 

Classification
Reagent name
Setting of LAS-4000
Method
Light
Filter
Iris
Chemiluminescence
ECL
Chemiluminescence
none
Through
0.85
ECL+
Chemiluminescence
none
Through
0.85
Lumi-Light Plus
Chemiluminescence
none
Through
0.85
Renaissance
Chemiluminescence
none
Through
0.85
Super Signal
Chemiluminescence
none
Through
0.85
Bright-Star
Chemiluminescence
none
Through
0.85
CDP-Star
Chemiluminescence
none
Through
0.85
CSPD
Chemiluminescence
none
Through
0.85

 

Fluorescence DYE

 

Classification
Reagent name
Setting of LAS-4000
Method
Light
Filter
Iris
Fluorescence dye
SYBR Green IFluorescence:SYBRGreen
Blue (460nm EPI)
Y515-Di
0.85
SYBR Green IIFluorescence:SYBRGreen
Blue (460nm EPI)
Y515-Di
0.85
EtBrFluorescence:EtBr
UV (312nmDIA)
605DF40
2.8
SYBR GoldFluorescence:SYBRGreen
Blue (460nm EPI)
Y515-Di
0.85
SYPRO RubyFluorescence:SYBRGreen
Blue (460nm EPI)
Y515-Di
0.85
SYPRO OrangeFluorescence:SYBRGreen
Blue (460nm EPI)
Y515-Di
0.85
SYPRO tangerineFluorescence:SYBRGreen
Blue (460nm EPI)
Y515-Di
0.85
FITCFluorescence:SYBRGreen
Blue (460nm EPI)
Y515-Di
0.85
FAMFluorescence:SYBRGreen
Blue (460nm EPI)
Y515-Di
0.85
EGFPFluorescence:GFP
Blue (460nm EPI)
510DF10
0.85
ECFPFluorescence:GFP
Blue (460nm EPI)
510DF10
0.85
RITCFluorescence:Cy3
Green (520nm EPI)
510DF20
0.85
Cy3Fluorescence:Cy3
Green (520nm EPI)
510DF20
0.85
Cy5Fluorescence:Cy5
Red (630nm EPI)
R670
0.85
Q-dotFluorescence:DAPI
UV (365nmEPI)
L41
2.8
Dy781Fluorescence:IR
Infrared (710nm EPI)
IR785
0.85
Fluorescence dye
(Chemifluorescence)
AttophosFluorescence:SYBRGreen
Blue (460nm EPI)
Y515-Di
0.85
ECL+Fluorescence:SYBRGreen
Blue (460nm EPI)
Y515-Di
0.85

 

Digitization

 

Classification
Reagent name
Setting of LAS-4000
Method
Light
Filter
Iris
Digitization
Silver stain
Digitization:DIA
White (DIA)
Through
2.8
CBB stain
Digitization:DIA
White (DIA)
Through
2.8
X-ray film
Digitization:DIA
White (DIA)
Through
2.8
NBT/BCIP
Digitization:EPI
White (EPI)
Through
2.8

Related Video

Basic Operation

Software

Maintenance

LAS4000 control software 이용해서 이미지 찍어보기

기동 방법

조작순서
조작방법
1
IDX 및 컴퓨터와 주변기기의 전원을 켭니다.
2
ImageQuant LAS 4000 Control Software를 기동시킵니다.
-> IQ LAS의 준비가 완료되기까지 메시지가 표시됩니다.
sw1-1
3
CCD 온도 설정상태가 Ready가 된 것을 확인합니다.
sw2
<Not Ready 상태>               <Ready 상태>

 

Tips
  • 전원을 켜고 ~ 10min 후 ready 상태가 됩니다. ready 상태에서는 Power LED만이 파란색으로 점등하게 됩니다. (보통 CCD 카메라의 냉각 온도는 –25℃로 설정)
  • CCD 온도 설정상태가 Not Ready에서도 Method/Tray position을 진행할 수 있습니다. 온도가 내려가기까지의 시간을 이용해 Sample을 Setting할 수 있습니다


Note

  • IDX의 전원과 컴퓨터의 전원은 어느 순서로 켜도 작동합니다.
  • 냉각 온도가 –25℃에서 안정되었을 때 Ready 상태가 됩니다.

Sample Setting

조작 순서
조작 방법
1
검출하려는 Sample에 맞는 Tray를 선택합니다.

 

검출 방법
Sample의 종류
Tray
화학발광
생물발광
MembraneEPI Tray
Titer plateNP Tray
형광Gel(trans UV 검출)UV-Trans Tray
Gel(LED 검출)EPI Tray
MembraneEPI Tray
DigitizeMembraneEPI Tray
Gel(CBB, silver 염색)*1WHITE-Trans Tray

 

2
Sample Tray에 Sample을 놓습니다.

 

<Sample를 놓는 방법>

(EPI Tray의 경우)
Tray 위로 Sample을 직접 놓습니다.

(UV-Trans Tray의 경우)
(1) Sample 크기보다 조금 크게 Gel sheet*2를 자릅니다.
(2) UV-Trans Tray에 Gel sheet를 놓습니다.
sw3
(3) Gel sheet 위로 Sample을 놓습니다.
sw4

3
<촬영 크기와 tray position>
(EPI Tray, WHITE-Trans Tray, UV-Trans Tray의 경우)
tray position에 따라 읽히는 범위가 달라지기 때문에 크기에 맞는 위치에 Sample을 놓습니다.sw5-1
4
IDX의 문을 열어 Tray를 set합니다. EPI Tray와 Trans Tray는 구멍이 있는 쪽이 가깝게 되도록 set합니다.

sw6.-1

5
IDX의 문을 닫습니다.

 

 

Tips

  • Gel sheet는 반복 사용이 가능합니다.
  • 중성 세제로 세척한 후, 증류수로 헹군 다음 건조시킵니다. 약 20회까지 사용할 수 있습니다.
  • EPI Tray는 각 tray position에 맞추기 위한 홈이 있습니다. 그 곳을 기준으로 삼아 Sample을 놓으면 편리합니다

Method/Tray position선택

조작 순서
조작 방법
1
Method/Tray position 버튼을 클릭합니다.

sw7

1) Method를 선택합니다.

검출 대상Method
화학발광Chemiluminescence
UV trans light (312nm)Fluorescence:EtBr
White EPI lightDigitize:EPI
IR EPI (710nm)을 이용한 형광Fluorescence:Dy781
RED EPI (630nm)을 이용한 형광Fluorescence:Cy5
GREEN EPI (520nm)을 이용한 형광Fluorescence:Cy3
BLUE EPI (460nm)을 이용한 형광Fluorescence:SYBRGreen,GFP
UV EPI 광원(365nm)를 이용한 형광Fluorescence:DAPI
White trans light을 이용한 DigitizeDigiize:Trans

 

2
Tray position을 Sample의 크기에 맞춰 선택합니다.
OK 버튼을 클릭합니다.
3
필터, 압축, Tray position이 자동적으로 선택된 것으로 전환됩니다.

초점 조정

1
Focusing 버튼을 클릭합니다.
sw8

 

화면 상을 클릭하면 확대, 축소가 가능하며 brightness와 adjust 버튼을 이용하여 focusing을 조정합니다.
Sample의 위치와 초점을 확인합니다.
Return 버튼을 클릭합니다.

Note: Brightness를 조정하여도 실제 촬영에는 영향을 미치지 않습니다.

노출 방법, 노출 시간

1
Exposure Type을 선택합니다.
sw9
2
Exposure Time에서 Manual 또는 Auto 버튼을 클릭합니다.
sw10
〈Auto의 경우〉 〈Manual의 경우>
Note: Method 및 Sample에 따라서는 Auto로 촬영할 수 없는 경우도 있습니다.

 

Note

Name
Decription
Precision설정된 노출 시간만 촬영
Increment각각의 이미지에 설정된 노출시간이 축적되어 촬영
Repetition각각의 이미지에 설정된 노출시간만 촬영
ProgramInterval 시간과 exposure시간을 사용자가 설정하여 촬영
sw11
  • Increment 기능 사용 시의 이미지 저장

Increment로의 촬영은 최대 100장까지 촬영이 가능하며, Save Select Image는 이 최신 16장 가운데서 임의의 이미지를 저장할 수 있습니다.
17장째 이전의 이미지를 저장하기 위해서는 Save passed images (up to 84 images)를 선택합니다.

감도 설정

1
Sensitivity를 선택합니다.
sw12

 

Note 검출 감도와 화소수에 대해

sw13
감도
화소수(가로×세로)
이미지 파일 크기
High Resolution
3072 × 2048
12.6MB
Standard
1536 × 1024
3.15MB
High
1536 × 1024
3.15MB
Super
1536 × 1024
3.15MB
Ultra
1536 × 1024
3.15MB
High Binning
768 × 512
786KB
Super Binning
384 × 256
197KB
Ultra Binning
192 × 128
49.2KB

촬영

1
Start 버튼을 클릭합니다.
sw14
이미지가 촬영이 시작됩니다.
-> 노출 중에는 IDX의 오랜지색 Busy LED이 점등합니다.

촬영 이미지의 저장

조작 순서
조작 방법
1
Save 버튼을 클릭하거나, File Menu의 Save 기능을 선택합니다.

<파일 형식>

Gel File Format(.gel)
정량성 있는 해석에 적합한 format입니다.

Linear 16 bit Gray(.tif)
16bit의 TIFF 형식 입니다.
기타 소프트로의 해석이 가능합니다.

8bit Color Tiff(.tif)
8bit의 Color 계조를 갖춘 Tiff 형식입니다.
콘트라스트 조정 후의 이미지를 그대로 저장할 수 있습니다.

Complete 버튼을 클릭합니다.
⇒처음 화면으로 돌아갑니다.

종료 방법

조작 순서
조작 방법
1
File Menu로부터 Quit을 선택합니다.
2
CCD의 냉각을 중지하거나 유지할지를 선택해 OK 버튼을 클릭합니다.
3
컴퓨터를 종료합니다.
4
IDX의 전원을 끕니다.

 

Tips
Keep the CCD cooling after quit을 선택할 경우, CCD의 냉각 온도가 유지된 상태가 되어 온도를 내리는 시간 없이 곧바로 사용할 수 있습니다.

이미지 분석 소프트웨어 사용방법 (IQTL)

IQTL 사용법

IQTL Software demo license 받는 방법

1. IQTL 8.1version demo license를 받을 수 있는 web 주소로 접속

http://demoelicense.gelifesciences.com/demo/?sw=29000818

 

2. 아래와 같은 화면이 뜹니다.

iqlt

 

3. 아래와 같이 고객님의 정보를 입력해 주시면, 입력하신 email로 demo license file이 발송 됩니다.

iqlt2

 

4. Download the install file을 클릭 하여 소프트웨어를 설치하시면 됩니다.
C:\Program Files\GE Healthcare\eLicense server\licenses 폴더에 demo license file을 저장 해주세요.

iqlt3

소프트웨어 설치방법

(1) USB control Driver

(2) USB function Driver

(3) ImageReader Software

Related Video

Basic Operation

Software

Maintenance

LED Light Source 교환 방법

LED light source 제거

①Lock을 위로 잡아 올립니다.
②한쪽 손으로 Lock 부분을 잡아 가볍게 앞쪽으로 당깁니다.
③낙사 광원을 위로 들어 올려 떼어냅니다.

maintenance1-1

LED light source 설치

①Lock이 올라간 상태로 hook에 올려둡니다.
②딱 소리가 날 때까지 슬라이드 시킵니다.
③Lock을 내립니다.

maintenance2-1

Calibration File 생성하기

CCD calibration file 생성하기

이 기능은 CCD 보정에 사용되는 보정파일을 생성합니다. 보정 파일은 Sensitivity, exposure time and CCD cooling temperature에 따라 적용이 됩니다.

 

1) CCD Calibration을 하기 위해 Option menu> CCD Calibration을 클릭합니다.

creationOfCalibrationFile_

No. 기능
1노출시간을 2시간이상 사용할 때 클릭
2노출시간을 1/100 sec ~ 2시간 까지 사용할 때 클릭
3Detection 되는 감도 선택( 모두 선택)
4CCD calibration에 필요한 시간이 보여짐
5Creation condition 선택

 

2) Start 버튼을 클릭합니다.

creationOfCalibrationFile_2

3) OK를 클릭합니다.

creationOfCalibrationFile_3

Flat Frame Calibration 생성하기

Flat frame calibration file은 광학 특성에 필요한 보정 파일을 생성합니다. 생성 된 flat frame file은 Light, filter, Iris 그리고 tray position에 따라 다르게 생성이 됩니다.

 

1) Flat frame calibration을 하기 위해 Option menu > Flat frame calibration 을 클릭합니다.

creationOfCalibrationFile_4

 

2) Method를 선택합니다.

creationOfCalibrationFile_5

 

3) 화면에 표기되어 있는 tray와 calibration plate를 IDX Box에 넣습니다.

creationOfCalibrationFile_6

 

4) 모든 tray position에 클릭합니다.

creationOfCalibrationFile_7

 

5) OK를 클릭합니다.

creationOfCalibrationFile_8

학술 문의

카카오톡 플러스친구 @지이헬스케어라이프사이언스 (1:1 실시간 문의)
E-mail : ts.kr@ge.com

견적 / 가격 문의

카카오톡 플러스친구 @지이헬스케어라이프사이언스 (1:1 실시간 문의)
02-6201-3800 (#3)
E-mail : Is.kr@ge.com

서비스 문의

카카오톡 플러스친구 @지이헬스케어라이프사이언스 (1:1 실시간 문의)
02-6201-3800 (#1)
E-mail : Is.service@ge.com

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