워크샵 신청하기

Process Column

video_thumb_process_colum_01

Process Column

BPG Column Packing Procedure

AxiChrom Column Packing Procedure

Constant Flow Packing Method

BPG column은 BioProcess Glasstube column으로 Qualification이 가능하여 GMP환경에서 사용될 수 있는 바이오프로세스용 컬럼으로 일반적으로 Pressure/Flow packing, 즉 아답터밑의 net를 통해 버퍼를 흘리면서 레진을 팩킹하도록 디자인 되어있습니다. Constant Flow Packing 방법은 아답터를 통해 일정한 유속을 주어 충진층을 안정화 및 가장 효율이 좋은 비율로 압착(Compression Factor (CF)=압착배수)을 시켜주는 방법 입니다.

기본적인 개념으로 먼저 레진 슬러리 부피를 계산하는 방법을 살펴보겠습니다.

일반적으로 슬러리 %라고 하는 것은 전체 혼합된 슬러리 용액 중 레진이 차지하는 %를 이야기 하는 것으로서 메스실린더에 일정 부피를 하루 이상 가라앉혀서 비율을 계산합니다.

p2

기본적으로 팩킹을 위해서는 50~60% 정도의 슬러리 %를 추천하고 있습니다. 또, 아가로스 계열의 레진의 특징 중 중요한 개념의 하나로서 위에서도 언급된 압착배수이라는 것은 레진의 특성상 신축성을 가지고 있기 때문에 일정한 성능을 가지기 위해서 추천되는 압착비율 입니다. 일반적인 Sepharose 레진의 경우 15% 즉 CF=1.15의 값을 가지게 되며, 이 압착비율만큼의 레진을 실제 컬럼볼륨에 추가하여 넣어주어야 합니다.

이런 경우 실제로 필요한 레진의 부피는

p3가 됩니다.

boc_column packing_procedure_01

이제 실제 컬럼팩킹 준비를 위해 컬럼의 아래쪽 outlet에 valve를 장착 후, 약 5-10cm 정도의 packing 용액을 넣어줍니다. 약간의 용액이 아래쪽 밸브를 통해 빠져나가면 밸브를 잠근 뒤, net에 trap된 남아있는 공기를 펌프를 이용하여 흡입하는 등의 방법을 통해 제거해준 뒤, 균질하게 혼합된 슬러리를 공기가 들어가지 않도록 조심히 컬럼 안으로 넣어줍니다.

아답터 상단의 로드 및 네트에 트랩된 공기를 미리 제거해주거나 아답터를 튜브 안으로 조심히 끼운 뒤 용액과 맞닿은 상태에서, EPDM O-ring을 잠궈준 뒤 아답터 로드 상단의 inlet으로 공기방울이 나오지 않을 때까지 살짝 내려 아답터 로드 및 상단 네트에 있는 공기를 제거해줍니다.

boc_column packing_procedure_02

이후 기본적인 라인 연결은 상기 그림과 같으며, 펌프와 압력계 대신 압력 및 흡광/전도도 모니터링 센서가 있는 펌프시스템(예> AKTAsystem)을 연결해주시면 팩킹 이후 컬럼 효율성 평가나 정제 프로세스를 바로 진행하실 수 있습니다.
주의하실 점은 팩킹을 하는 동안 유속을 줄 때는 상단의 O-ring을 잠근 상태에서 아래쪽 밸브는 열어주셔야 하며, 유속을 멈출 시에는 반드시 아래쪽 밸브를 잠가주셔야 합니다. (밸브를 열어두실 경우 중력에 의해 내부 용액이 빠져나가 레진마름 현상이 발생할 수 있습니다.)

boc_column packing_procedure_03

일반적으로 constant flow packing 방법은 2단계로 이루어지며, 첫번째 단계로는 낮은 유속을 통해 혼합된 슬러리의 레진을 균일하게 가라앉혀준 뒤, 두번째 단계로 빠른 유속을 통해 레진에 따라 추천되는 일정한 압력을 주어 압착배수를 감안하여 레진을 팩킹하게 됩니다.

boc_column packing_procedure_04

첫번째 단계에서 베드가 안정화 되면, 유속을 멈추고 아래의 밸브를 잠근 다음, 상단의 O-ring을 풀어 준 뒤 위그림과 같이 아답터를 안정화된 충진체에 닿지 않을 정도까지 가까이 내려줍니다.
이후 다시 O-ring을 잠근 뒤, 두번째 단계의 빠른 유속을 적용하며 아래쪽 밸브를 열어주도록 합니다. 이는 원하는 만큼의 비율로 균질하게 압착을 시키기 위함입니다.

process10

빠른 유속을 준 뒤 베드가 안정화 되면, 유속을 멈추고 밸브를 잠근 다음, O-ring을 잠근 채로 아답터를 안정화되었던 높이까지 아답터를 내려주거나 2번 단계를 반복한 뒤 팩킹을 완료합니다.

만일 아답터를 천천히 내리는 경우 압착되었던 레진이 압력이 풀리면서 제자리로 돌아오게 되므로 빠르게 안정적으로 아답터를 내려주어야 합니다.

BPG Column Packing Procedure

AxiChrom Column Packing Procedure

Axial Compression Packing Method

AxiChrom column은 Axial compression 방법을 사용하여 팩킹을 하는 컬럼의 일종입니다. 이는 Qualification과 Intelligent Packing 소프트웨어를 활용한 Column packing의 자동화가 가능하여 GMP환경에서 사용자의 편의 및 팩킹의 질을 일정하게 유지할 수 있도록 디자인 되었습니다.

AxiChrom 컬럼은 Axial compression의 방법을 통해 컬럼을 팩킹하는데, 이는 레진에 직접 유속을 주어 팩킹하는 flow 팩킹방법과는 달리, 컬럼 아답터의 축을 수압(유압) 또는 전기모터를 통해 수직으로 내려주면서 컬럼 내부의 여유분의 용액을 제거하면서 팩킹하는 방식입니다.

팩킹을 진행하기 전, 실험실 용도의 lab 컬럼이나 BPG 컬럼과 마찬가지로 필요한 레진의 양을 계산하여 줍니다. AxiChrom 컬럼의 경우에는 압착배수 (Compression Factor, CF) 대신 팩킹팩터 (Packing factor, PF)를 고려하여 실제 필요한 레진의 양을 계산하게 되고, 일반적인 Sepharose 레진의 경우 팩킹팩터는 압착배수와 동일한 1.15의 값을 가지며 이 비율만큼의 레진을 실제 컬럼볼륨에 추가하여 넣어주어야 합니다. 이러한 과정은 Intelligent Packing Software에서 필요한 값을 넣어주면 자동으로 계산되어 Packing Recipe로 팩킹과정 및 필요한 사항을 미리 확인할 수 있습니다.

Axichrom_1

Axichrom 컬럼팩킹

  1. ÄKTA system과 연결
  2. 컬럼의 수평 맞추기
  3. Intelligent Packing Software로 팩킹과정 설정
  4. Bed support priming
  5. 컬럼에Slurry 넣어주기
  6. Adaptor 결합
  7. Hydraulic chamber 의 공기제거
  8. Hydraulic chamber에 용액을 투입하며 축을 내리면서 Axial packing

의 순서로 진행됩니다.  자세한 사항은 아래의 동영상 (3분20초)을 참조하십시오.

관련동영상



학술 문의

카카오톡 플러스친구 @지이헬스케어라이프사이언스 (1:1 실시간 문의)
E-mail : ts.kr@ge.com

견적 / 가격 문의

카카오톡 플러스친구 @지이헬스케어라이프사이언스 (1:1 실시간 문의)
02-6201-3800 (#3)
E-mail : Is.kr@ge.com

서비스 문의

카카오톡 플러스친구 @지이헬스케어라이프사이언스 (1:1 실시간 문의)
02-6201-3800 (#1)
E-mail : Is.service@ge.com

PGlmcmFtZSB3aWR0aD0iMTAwJSIgaGVpZ2h0PSIxMDAlIiBzcmM9Imh0dHBzOi8vd3d3LnlvdXR1YmUuY29tL2VtYmVkL2JydlJMOXFGQUNJIiBmcmFtZWJvcmRlcj0iMCIgYWxsb3dmdWxsc2NyZWVuPjwvaWZyYW1lPj9yZWw9MCIgZnJhbWVib3JkZXI9IjAiIGFsbG93ZnVsbHNjcmVlbj48L2lmcmFtZT4=
PGlmcmFtZSB3aWR0aD0iMTAwJSIgaGVpZ2h0PSIxMDAlIiBzcmM9Imh0dHBzOi8vd3d3LnlvdXR1YmUuY29tL2VtYmVkL1JucjlKcXd2WHlNIiBmcmFtZWJvcmRlcj0iMCIgYWxsb3dmdWxsc2NyZWVuPjwvaWZyYW1lPj9yZWw9MCIgZnJhbWVib3JkZXI9IjAiIGFsbG93ZnVsbHNjcmVlbj48L2lmcmFtZT4=
PGlmcmFtZSB3aWR0aD0iMTAwJSIgaGVpZ2h0PSIxMDAlIiBzcmM9Imh0dHBzOi8vcGxheWVyLnZpbWVvLmNvbS92aWRlby8xNTAzMTY4NTI/Y29sb3I9ZmZmZmZmJnRpdGxlPTAmYnlsaW5lPTAmcG9ydHJhaXQ9MCZiYWRnZT0wIiBmcmFtZWJvcmRlcj0iMCIgYWxsb3dmdWxsc2NyZWVuPjwvaWZyYW1lPg==
PGlmcmFtZSB3aWR0aD0iMTAwJSIgaGVpZ2h0PSIxMDAlIiBzcmM9Imh0dHBzOi8vcGxheWVyLnZpbWVvLmNvbS92aWRlby8xNjk2Mzg4MTc/Y29sb3I9ZmZmZmZmJnRpdGxlPTAmYnlsaW5lPTAmcG9ydHJhaXQ9MCZiYWRnZT0wIiBmcmFtZWJvcmRlcj0iMCIgYWxsb3dmdWxsc2NyZWVuPjwvaWZyYW1lPg==